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:小鼠白介素4(IL- 4) ELISA试剂盒,小鼠白介素4 ELISA试剂盒,小鼠IL- 4 Eli

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 小鼠白介素4(IL- 4) ELISA试剂盒,小鼠白介素4 ELISA试剂盒,小鼠IL- 4 Elisa试剂盒

 

一、基本信息:

中文名称:小鼠白介素4(IL- 4) ELISA试剂盒,小鼠白介素4 ELISA试剂盒,小鼠IL- 4 Elisa试剂盒

英文名称:Mouse IL- 4 ELISA Kit, Mouse interleukin 4 ELISA Kit

品牌:泽维尔

货号:ZWL- M00041

规格:96T/盒和48T/

样本体积:50~100ul

保存温度及有效期:2~8度下6个月,尽量保持恒温,以免抗体失活。

用途:用于测定血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中待测物质的含量。

二、试剂盒原理:

本试剂盒采用双抗体夹心法测定样本中待测物的水平。用已知浓度的待测物质的标准品和未知浓度的样品依次先后加入微孔板,先将待测物质和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,再与亲和素标记过的HRP结合,再经过彻底洗涤后,加入底物AB,底物在HRP酶的催化下产生颜色。颜色的深浅和样品中待测物质的浓度呈比例关系。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中待测物质的含量。

三、试剂盒组成:

 

四、试剂盒的操作步骤:

1.         标准品的加样:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;。

2.         加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.         加酶:每孔加入酶标试剂100μl,空白孔除外。

4.         温育:用封板膜封板后置37温育60分钟。

5.         配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。

6.         洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

7.         显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37避光显色15分钟.

8.         终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

9.         测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

五、实验操作过程中的注意点:

1.       试剂应按说明书要求保存,实验前样本和试剂盒室温平行1小时,如果样本是冻存样本,应提前拿到2-8摄氏度进行解冻,不建议直接室温解冻

2.       若样本较少,用不完的酶标应立即放回包装袋中,密封保存,以免失效。

3.       在做完整个实验仪器之前,仪器最好预热半小时,这个计算好时间,也可以直接将仪器一直开着,直到整个实验结束。

4.       在加液过程中不要使枪头触及到板子底部,一般枪头都悬空,可以将枪头靠在孔边缘,但枪头尖悬空,如果枪头上残留液体看整体多少量,不要吹打下去。特别忌讳在孔内壁流向孔。整个加液过程不要产生气泡。(洗涤液除外)

5.       封板膜只限一次使用,避免交叉使用。

六、不同样本的处理要求及保存温度:

1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBSPH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBSPH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8的温度。加入一定量的PBSPH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20保存,但应避免反复冻融.

7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

七、在选择试剂盒类型时需先明确以下几点:

1.       要检测的是抗体还是抗原。

2.       要定量检测还是定性检测

3.       是否需要检测具有特异抗体的类型

 

 

南京泽维尔生物科技有限公司长期供应小鼠,大鼠,豚鼠,人,鸡,羊,牛,鸭,猪,鱼,土,植物Elisa试剂盒等,如有需要,可及时与我司销售联系,电话18852077652

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